Informacje Naukowe na Temat Tian Xian: Efekty i Korzyści Ziołowego Suplementu Przeciwko Rakowi

Eksperymentalne Badania Wpływu Eliksiru Tian Xian na Nieswoistą Odporność Myszy

Opracowanie to opisuje badania wpływu FRC001 na nieswoistą odporność myszy i odrzutu przeszczepu (graft versus host reaction – GVHR). Otrzymane wyniki wskazują, że FRC001 posiada pewien wpływ na wzmożenie funkcji fagocytarnej monojądrowych makrofagów, wskaźnik śledziony i grasicy, przemianę śledzionowych limfocytów, formacji surowicy hemolitycznej, współczynnika reakcji zwrotnej śledziony oraz współczynnika stymulacji i wskaźnika bodźca, np. FRC001 może zwiększyć i usprawnić humoralną i komórkową odporność, stanowiąc podstawę eksperymentalnego stosowania go w regulacji odporności oraz zapobieganiu rozwoju i leczeniu guzów nowotworowych.

Badanie Farmakologicznego Oddziaływania Przeciwnowotworowego Eliksiru Tian Xian

Badania przeprowadzone na Eliksirze “CHINA NO. 1 Tian Xian” wykazały jego znaczne działanie hamujące u myszy rozwój guza litego nowotworu S120, nowotworu płuc Lewis’a, odżołądkowego nowotworu łuszczastego, oraz ludzkiego śluzowatego gruczolakoraka jelit u myszy gołej. Antyneoplastyczne oddziaływanie Eliksiru “China No. 1 Tian Xian” Zwierzę eksperymentalne : Mysz z Kunmin, dostarczona przez Tianjin Medical College, grupa zawierająca osobniki obu płci; męskiej i żeńskiej, wagi pomiędzy 18 ~ 22g.

Badania Efektywności Hamowania Wzrostu Transplantów Mięsaka S180 i Hepatocarcinoma (Raka Wątroby) za Pomocą Eliksiru Tian Xian

Wszczepiony mięsak S180 i nowotwór wątroby myszy stanowią najpopularniejszy, a zarazem najbardziej adekwatny model w badaniach antyneoplastycznych leków. Opracowanie to bada hamujący wpływ FRC001 na dwa powyższe modele. Uzyskane w trakcie eksperymentu wyniki, wskazują, że FRC001 miał hamujący wpływ na rozwój mięsaka S180 oraz raka wątroby u badanych myszy. Współczynniki hamowania wzrostu S180 w przypadku zastosowania wysokich, średnich oraz małych dawek FRC001 wynosiły odpowiednio 59.73%, 52.57% i 41.33% co w wyraźny sposób wskazuje na efekt działania leku ściśle zależny od zaaplikowanej dawki; FRC001 wykazywał również pewne pozytywne działanie na skupiska nowotworu wątroby, a współczynnik hamowania wzrostu w tym przypadku wyniósł 47.81%; po zakończeniu eksperymentu, średnia waga guzów zmniejszyła się, a skupiska nowotworowe skurczyły się wyraźnie w porównaniu do wyników grupy kontrolnej (P<0.05 lub P<0.01). FRC001 jest głównym składnikiem nowego leku Tradycyjnej Medycyny Chińskiej o działaniu wybitnie antyneoplastycznym.

Badania Toksykologiczne FRC001 (Eliksiru Tian Xian) Poniższe materiały stanowią wyniki badań prowadzonych przez Centrum Badań Medycznych oraz Biologii Wolnych Rodników w Taipei na Tajwanie

Zgodnie z wskaźnikiem porównawczym, treścią i metodą badań toksykologicznych, przeprowadziliśmy na FR001 test ostrej toksyczności, test toksyczności skumulowanej, mikrojądrowy test erytrocytów polichromatycznych myszy, test aberracji spermy oraz test Amesa. W wyniku badań, w przypadku FRC001 test ostrej toksyczności, test toksyczności skumulowanej i test Amesa wykazały normalne wyniki, podczas gdy wskaźnik mikrojądrowy erytrocytów polichromatycznych i wskaźnik aberracji spermy były znacznie wyższe niż w grupie kontrolnej. Otrzymane rezultaty odzwierciedlają wartość bezpiecznego poziomu Edfrnn i dostarczają danych dotyczących dawkowania i sposobu podawania FRC001.

Efekty Niszczące FRC001 – Eliksiru China No.1 Tian Xian na Wolne Rodniki Tlenowe

Badania niszczących efektów działania FRC001 na wolne rodniki tlenowe metodą ESR, metodą chemoluminiscencji BJL oraz przy pomocy wielu innych technik wykazały, że są one porównywalne z działaniem witamin z grupy C i E. Wykazano również, że FRC001 może efektywnie niszczyć wolne rodniki tlenowe wytwarzane w PMN, pobudzane przez PMA i utlenianie xantynowo/xantynowe, napromieniowanie ryboflaviny /EDTA i Reakcję Fentona. Odkryto również, że hamuje on różnorodne martwice i oddziaływanie produktów reakcji TBA (tzw. TBARAM) które tworzą się odpowiednio w wyniku tłuszczowej peroksydacji kwasu linolinowego i liposomów. Posiada on także zdolność efektywnego niszczenia ONOO.

Chińska Mieszanka Ziołowa, Płyn Tien-Hsien, Wywołuje Zatrzymanie Cyklu G2/M i Wrażliwość na Promieniowanie w Komórkach Raka Piersi MCF-7 U ludzi poprzez Mechanizmy Związane z Obniżeniem Ekspresji DNMT1 i Rad51

Chińska mieszanka ziołowa, Płyn Tien-Hsien (THL), udowodniła, że hamuje wzrost i inwazyjność komórek rakowych i obecnie jest uznawana za medycynę uzupełniającą w leczeniu nowotworów. W naszym poprzednim badaniu, wykorzystującym komórki ostrej białaczki promielocytowej, odkryliśmy jej wpływ na obniżenie ekspresji metylotransferazy DNA 1 (DNMT1), która często jest nadmiernie wyrażana w komórkach nowotworowych, prowadząc do represji supresorów nowotworowych poprzez hiper-metylozację. W niniejszym badaniu zbadaliśmy efekty THL w komórkach raka piersi MCF-7, które również wykazują podwyższone poziomy DNMT1. Wyniki pokazują, że THL w zależności od dawki obniżał poziom DNMT1, co było związane z indukcją supresorów nowotworowych, takich jak p21 i p15. THL zatrzymywał cykl komórkowy w fazie G2/M i zmniejszał poziomy białek cykliny A, cykliny B1, fosfo-pRb oraz AKT. Inhibicja DNMT1 była wcześniej zgłaszana jako działająca radiosensybilizująco na komórki rakowe poprzez represję naprawy DNA. Odkryliśmy, że THL zwiększał promienioczułą śmierć klonogenną komórek w MCF-7 i obniżał poziom białka naprawiającego podwójne złamania DNA, Rad51. Nasze obserwacje mogą być wynikiem obniżenia ekspresji DNMT1. Biorąc pod uwagę, że inhibicja DNMT1 jest obecnie powszechną strategią terapii przeciwnowotworowej, dalsze badania kliniczne THL w celu potwierdzenia jej skuteczności klinicznej są uzasadnione. 

Chińska Mieszanka Ziołowa Płyn Tien-Hsien Wzmacnia Odporność Przeciwnowotworową u Myszy Szczepionych Komórkami Nowotworowymi

Tło: Chińska mieszanka ziołowa, Płyn Tien-Hsien (THL), jest stosowana jako suplement diety przeciwnowotworowej od ponad 20 lat. Nasze wcześniejsze badania wykazały, że THL może modulować odpowiedź immunologiczną i hamować wzrost nowotworów. W niniejszym badaniu dodatkowo oceniono wpływ THL na odpowiedź immunologiczną przeciwnowotworową u myszy szczepionych komórkami nowotworowymi napromieniowanymi promieniowaniem γ.

Metody: Działanie przeciwnowotworowe THL oceniano u myszy szczepionych komórkami rakowymi jelita grubego o niskiej złośliwości CT-26-low lub napromieniowanymi promieniowaniem γ komórkami rakowymi jelita grubego o wysokiej złośliwości CT-26-high. Liczbę komórek naturalnych zabójców (NK) i limfocytów T w śledzionie analizowano metodą cytometrii przepływowej. Aktywność zabijania nowotworów przez komórki NK i limfocyty T cytotoksyczne (CTL) badano metodą cytometrii przepływowej, używając komórek YAC-1 i CT-26-high jako komórek docelowych. Poziomy IFN-γ, IL-2 i TNF-α określono metodą ELISA.

Wyniki: THL hamował wzrost nowotworu CT-26-high u myszy wcześniej szczepionych komórkami CT-26-low o niskiej złośliwości lub napromieniowanymi komórkami CT-26-high. THL zwiększał populację komórek NK i limfocytów T CD4+ w śledzionie oraz wzmacniał aktywność zabijania nowotworów przez komórki NK i CTL u myszy szczepionych napromieniowanymi komórkami CT-26-high. THL zwiększał produkcję IFN-γ, IL-2 i TNF-α u myszy szczepionych napromieniowanymi komórkami CT-26-high.

Wnioski: THL może wzmacniać odpowiedzi immunologiczne przeciwnowotworowe u myszy szczepionych zabitymi komórkami nowotworowymi. Wyniki te sugerują, że THL może być stosowany jako lek uzupełniający dla pacjentów onkologicznych, którzy wcześniej byli leczeni szczepionkami z martwymi komórkami nowotworowymi, terapią radiacyjną lub chemioterapią.

Kompleksowa i Holistyczna Analiza Komórek Raka Jelita Grubego HT-29 oraz Modelu Myszy Nude z Nowotworem: Interakcje Między Frakcjami Pozyskanymi z Chińskiej Formuły Leczniczej Tian Xian Liquid w Wpływie na Nowotwór Jelita Grubego u Ludzi

Chińska formuła lecznicza Tian Xian Liquid (TXL) jest stosowana klinicznie w terapii nowotworowej w Chinach od ponad 25 lat. Jednakże kompleksowe i holistyczne działanie jej bioaktywnych frakcji w kontekście różnych efektów terapeutycznych przeciwnowotworowych nie zostało dotychczas w pełni zrozumiane. Jest to pierwsze badanie, które naukowo wyjaśnia holistyczny wpływ chińskiej formuły leczniczej na leczenie raka jelita grubego, co pozwala lepiej zrozumieć istotę formuły chińskiej poprzez porównanie działania TXL i jej funkcjonalnych frakcji, w tym frakcji octanu etylu (EA), butanolu (BU) i wodnej (WA).

Efekty specyficzne dla tkanek tych frakcji na komórki raka jelita grubego HT-29 i splenocyty badano przy użyciu testu MTT. Ich wpływ na ekspresję markerów antyproliferacyjnych, antymetastatycznych oraz na odwracanie oporności wielolekowej w traktowanych komórkach HT-29 badano za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym oraz analizy Western blot. Ich wpływ w modelu myszy nude z przeszczepionym nowotworem również badano metodą Western blot.

Wyniki ujawniły, że frakcja EA nieznacznie hamowała proliferację komórek HT-29, ale specyficznie dla tkanek wywierała najsilniejszy efekt antyproliferacyjny na splenocyty. Z drugiej strony, tylko TXL i frakcja BU specyficznie dla tkanek przyczyniały się do proliferacji splenocytów, ale hamowały proliferację komórek HT-29. Frakcja WA wykazywała najsilniejszy efekt antyproliferacyjny na komórki HT-29 oraz najsilniejsze działanie hamujące wzrost nowotworu w modelu myszy nude w naszym wcześniejszym badaniu. W modelu HT-29, TXL i frakcja WA wywierały najbardziej wyraźny wpływ na zwiększenie poziomu mRNA i białka p21; TXL oraz frakcje EA i WA wywierały wpływ na obniżenie poziomu białka cykliny D1 mRNA i białka w fazie G1 cyklu komórkowego; frakcje EA i BU wykazywały najbardziej wyraźny efekt przeciwinwazyjny poprzez obniżenie poziomu mRNA MMP-1; TXL skutecznie odwracał większość oporności wielolekowej poprzez obniżenie poziomu białka MDR-1.

Wnioski: Kompleksowe i holistyczne efekty TXL zostały udowodnione przez (a) wzajemne wzmocnienie i wzajemne podkreślenie, (b) wzajemne przeciwstawienie się i wzajemne tłumienie, oraz (c) wzajemną antagonistyczność między trzema frakcjami składowymi. Ponadto, projekt obecnego badania może prowadzić do dalszego rozwoju bardziej specyficznych dla tkanek skutecznych leków o minimalnych efektach ubocznych do stosowania klinicznego w walce z rakiem.

Eliminacja Komórek „Side Population” Podobnych do Komórek Macierzystych Raka w Liniach Komórkowych Hepatoma przez Chińską Mieszankę Ziołową „Płyn Tien-Hsien”

Coraz więcej dowodów sugeruje, że nawroty nowotworów mogą wynikać z małej subpopulacji komórek macierzystych raka, które są odporne na konwencjonalną chemioterapię i radioterapię. Badaliśmy wpływ chińskiej mieszanki ziołowej Płyn Tien-Hsien (THL) na komórki „side population” (SP) podobne do komórek macierzystych, izolowane z ludzkich komórek hepatoma. Po sortowaniu i dalszej hodowli, komórki SP z komórek hepatoma Huh7 wykazywały wyższą klonogenność oraz wyższe poziomy mRNA genów związanych z cechami komórek macierzystych, takich jak SMO, ABCG2, CD133, β-katenina i Oct-4, niż komórki nie-SP.

Przy dawce 2 mg/mL, THL zmniejszał proporcję komórek SP w komórkach HepG2, Hep3B i Huh7 z 1,33% do 0,49%, z 1,55% do 0,43% i z 1,69% do 0,27%, odpowiednio. Żywotność i tworzenie kolonii komórek Huh7 SP były skutecznie hamowane przez THL w zależności od dawki, co było związane z inhibicją genów związanych z cechami komórek macierzystych, takich jak ABCG2, CD133 i SMO. Tumorogenność komórek Huh7 SP traktowanych THL u myszy NOD/SCID również została zmniejszona. Ponadto, połączenie THL z doksorubicyną mogło synergizować działanie doksorubicyny przeciwko komórkom Huh7 SP. Nasze dane wskazują, że THL może działać jako terapeutyki ukierunkowane na komórki macierzyste nowotworu i być uznawane za medycynę uzupełniającą i integracyjną w leczeniu hepatoma.

Bezpieczeństwo i Skuteczność Praktyczna Płynu Tien-Hsien u Pacjentek z Opornego Metastatycznego Raka Piersi:
Randomizowane, Podwójnie Ślepe, Kontrolowane Placebo, Grupowe, Badanie Kliniczne Faz IIa

Aby ocenić bezpieczeństwo i skuteczność Płynu Tien-Hsien Practical (THL-P), chińskiej mieszanki ziołowej, u pacjentek z opornym metastatycznym rakiem piersi, przeprowadziliśmy randomizowane, podwójnie ślepe, kontrolowane placebo, grupowe badanie pilotażowe fazy IIa. Pacjentki zostały losowo przypisane do grupy otrzymującej THL-P lub do grupy placebo i były monitorowane co 4 tygodnie przez 24 tygodnie.

Głównym punktem końcowym była zmiana w skali globalnego stanu zdrowia/jakości życia (GHS/QOL). Drugorzędnymi punktami końcowymi były zmiany w skalach funkcjonalnych i objawowych, efekty immunomodulujące oraz działania niepożądane. W badaniu wzięło udział 63 pacjentki w okresie od czerwca 2009 do czerwca 2011 roku. Populacja do analizy zamiaru leczenia obejmowała 28 pacjentek w grupie THL-P oraz 11 pacjentek w grupie placebo.

W porównaniu do grupy placebo, grupa THL-P wykazała istotną poprawę w zakresie GHS/QOL od wartości wyjściowej do ostatniej wizyty (41,7 versus −33,3; P < 0,05), oraz w zakresie liczby komórek CD3, CD4/CD8, CD19, CD16+56 pozytywnych (P < 0,05). Grupa THL-P osiągnęła także wyższe poziomy funkcjonowania fizycznego, roli, emocjonalnego i poznawczego, a także zmniejszenie zmęczenia i ogólnoustrojowych efektów ubocznych. Działania niepożądane związane z leczeniem obejmowały łagodną konstypację i miejscowe swędzenie; nie zgłoszono poważnych działań niepożądanych.

THL-P wydaje się być bezpieczną alternatywną terapią wspomagającą dla pacjentek z opornym metastatycznym rakiem piersi, skutecznie poprawiającą jakość życia i łagodzącą objawy związane z rakiem.

Różne efekty mechanizmów przeciwnowotworowych Płynu Tian-Xian (TXL) i jego bioaktywnych frakcji na ludzkie modele raka jelita grubego

Cel badania: Celem tego badania było wyjaśnienie i porównanie mechanizmów przeciwnowotworowych Płynu Tian-Xian (TXL) i jego bioaktywnych składników, tj. butanolu (BU), octanu etylu (EA) oraz frakcji wodnej (WA), na ludzkie modele raka jelita grubego zarówno in vitro (komórki raka HT-29), jak i in vivo (przeszczepy nowotworowe u myszy nude).

Materiały i metody: Działanie przeciwnowotworowe TXL i jego bioaktywnych składników na komórki HT-29 oceniano za pomocą testu MTT. Ich wpływ na ekspresję potencjalnych markerów angiogenezy i metastaz były badane za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy w czasie rzeczywistym oraz analizy Western blot na poziomach transkrypcyjnym i translacyjnym. W badaniu in vitro, zdolność migracji komórek HT-29 oceniano przy użyciu testu gojenia ran. W badaniu in vivo codziennie mierzono wielkość i objętość guzów w przeszczepach.

Wyniki: TXL, BU, EA i WA skutecznie hamowały proliferację komórek HT-29 w sposób zależny od dawki i czasu. Wartość IC50 dla TXL uzyskano po inkubacji z 1% (v/v) TXL przez 4 godziny; natomiast wartości IC50 dla pozostałych składników bioaktywnych były następujące: BU przy 1,25% (v/v); EA przy 5% (v/v); oraz WA przy 0,3125% (v/v). Stwierdzono, że 1% (v/v) TXL znacząco obniżał ekspresję MMP-2 i MMP-7 na poziomie transkrypcyjnym i translacyjnym oraz redukował ekspresję białek MMP-9 i VEGF in vitro. TXL zmniejszał zdolność metastatyczną komórek HT-29, co potwierdzono testem gojenia ran. TXL i jego frakcje bioaktywne nie powodowały istotnych zmian w masie ciała, co wskazuje na brak toksyczności dla przeszczepów.

Wnioski: Podsumowując, TXL działa wielokierunkowo, obniżając markery metastazy zarówno w modelach in vitro, jak i in vivo. Efekty jego bioaktywnych frakcji nie były jednak wyraźne. Badanie to szczegółowo wyjaśniło mechanizm przeciwnowotworowy TXL, co jest istotne dla rozwoju przyszłych schematów leczenia nowotworów w chińskich formułach leczniczych.

Wpływ Terapii Ziołowej na Ekspresję Cytokin We Wnętrzu Komórek CD8 u Pacjentów z Rakiem Nosogardłowym

Cele: Celem badania było poznanie wpływu ziołowego leku THL na odpowiedź immunologiczną pacjentów z rakiem nosogardłowym (NPC) poprzez pomiar poziomów cytokin wewnątrzkomórkowych (IFN-γ i TNF-α) przed i po podaniu THL. Chciano również wprowadzić metodę oceny cytokin wewnątrzkomórkowych do oceny odpowiedzi immunologicznej.

Metody: Do badania włączono piętnastu pacjentów z rakiem nosogardłowym, którzy przez 4 tygodnie otrzymywali Płyn Tien-Hsien (THL) cztery razy dziennie. Przed i po leczeniu THL pobierano próbki krwi (10 mL) w celu pomiaru cytokin wewnątrzkomórkowych (IFN-γ i TNF-α) zarówno spontanicznie, jak i po stymulacji fitohemaglutininą (PHA). Poziomy IFN-γ i TNF-α mierzone były za pomocą testu cytometrii przepływowej.

Wyniki: Po leczeniu THL zaobserwowano wzrost zarówno spontanicznych, jak i stymulowanych cytokin wewnątrzkomórkowych. Procentowe różnice spontanicznego IFN-γ i TNF-α wyniosły 4,62±1,39 i 4,89±1,39; natomiast dla stymulowanego IFN-γ i TNF-α wyniosły 3,98±1,29 i 1,65±3,82. Ocena wewnątrzkomórkowych IFN i TNF-α może być przeprowadzana w naszym laboratorium jako alternatywna metoda oceny poziomów IFN i TNF-α w surowicy. W ocenie poziomów IFN i TNF-α w surowicy, mierzony poziom pochodził z różnych typów komórek, takich jak makrofagi i komórki śródbłonka, podczas gdy stosowana przez nas metoda wewnątrzkomórkowa mierzyła białka produkowane przez komórki CD8.

Wnioski: THL może modulować odpowiedź immunologiczną komórek poprzez zwiększenie poziomów cytokin wewnątrzkomórkowych (IFN-γ i TNF-α) w komórkach CD8+, co sugeruje, że to zioło może być potencjalnym środkiem immunoterapeutycznym wspomagającym leczenie nowotworów, zwłaszcza raka nosogardłowego.

Regulacja Ekspresji p21, MMP-1 i MDR-1 w Ludzkich Komórkach Raka Jelita Grubego HT29 przez Płyn Tian Xian, Chińską Formułę Leczebną, In Vitro i In Vivo

Streszczenie

Znaczenie etnofarmakologiczne: Płyn Tian-Xian (TXL), dostępny komercyjnie chiński wyciąg ziołowy, jest stosowany jako środek przeciwnowotworowy od ponad 10 lat bez zgłoszonych działań niepożądanych.

Cel badania: Celem badania była ocena bezpieczeństwa i spójności jakościowej TXL oraz zrozumienie jego mechanizmów działania w zakresie przeciwdziałania proliferacji, metastazie i odwracania oporności na leki (MDR).

Materiały i metody: W badaniu wykorzystano spektrofotometr atomowy oraz wysokosprawną chromatografię cieczową z detekcją w układzie diodowym (HPLC-DAD) do oceny głównych toksycznych elementów i spójności jakościowej różnych partii ekstraktów TXL. Użyto linii komórkowej HT29 ludzkiego raka jelita grubego oraz myszy nude z przeszczepami nowotworowymi. TXL dostarczył China-Japan Feida Union Company Limited. Badano wpływ TXL na proliferację komórek HT29 in vitro. Procenty komórek w różnych fazach cyklu komórkowego analizowano za pomocą cytometrii przepływowej. Efekt przeciwnowotworowy po leczeniu TXL oceniano na podstawie poziomów białek p21, cykliny D1, PCNA i cdk-2, które są kluczowymi regulatorami postępu cyklu komórkowego. Równocześnie, poziomy białek MMP-1 i MDR-1 (białko oporności wielolekowej) oceniano, aby zbadać wpływ TXL na metastazę i odwracanie MDR.

Wyniki: Zawartość głównych toksycznych elementów w ekstrakcie TXL była niższa niż standardy ustalone przez Departament Zdrowia Hongkongu. Wyniki HPLC pokazały, że względne odchylenia standardowe dla ilości 5 standardów były mniejsze niż 5% w różnych partiach TXL. Analiza immunoblottingowa ujawniła znaczną indukcję inhibitora kinazy cykliny p21 oraz inhibicję cykliny D1, PCNA i cdk-2 w modelach in vitro traktowanych TXL, co utrudniało przechodzenie komórek z fazy G1/S. Wyniki uzyskane w badaniach in vivo również wykazały, że TXL zwiększał poziom białka p21 oraz zmniejszał poziom białek MMP-1 i MDR-1.

Wnioski: Wyniki uzyskane w ramach niniejszego badania nie tylko potwierdzają bezpieczeństwo i jakość ekstraktu TXL, ale także wykazują, że TXL posiada aktywność przeciwnowotworową i przeciwestadialną oraz działa na odwrócenie oporności na leki zarówno w komórkach HT29, jak i w tkankach przeszczepów nowotworowych u myszy nude.

Ukierunkowanie na PML-RARα i Szlaki Sygnalizacyjne Nowotworowe przez Chińską Mieszaninę Ziołową Tien-Hsien Liquid w Komórkach NB4 Ostra Promielocytowa Białaczka

Płyn Tian-Xian (THL) to chińska mieszanka ziołowa, która była stosowana na całym świecie jako terapia uzupełniająca dla pacjentów z nowotworami w ciągu ostatniej dekady. Ostatnio wykazano, że THL może indukować apoptozę w różnych typach komórek nowotworowych in vitro. Jednakże, podstawowe mechanizmy molekularne nie zostały jeszcze dokładnie wyjaśnione. W tym badaniu zbadaliśmy wpływ THL na komórki ostrej promielocytowej białaczki (APL) NB4, które mogą być skutecznie leczone przez niektóre tradycyjne chińskie preparaty zawierające arsen.

Wyniki wykazały, że THL może indukować zatrzymanie cyklu komórkowego w fazie G2/M oraz apoptozę w komórkach NB4. Zaobserwowano spadek poziomów cykliny A i B1 w komórkach traktowanych THL. Apoptoza indukowana przez THL była związana z aktywacją kaspazy-3 oraz zmniejszeniem poziomu białka fuzji PML-RARα. Ponadto, THL obniżał poziomy DNA metylotransferazy 1 oraz szlaki sygnalizacyjne nowotworowe, takie jak Akt/mTOR, Stat3 i ERK.

Za pomocą ekstrakcji etylu octanowego i chromatografii na żelu krzemionkowym, wyizolowano aktywną frakcję THL nazwaną EAS5. Przy dawce około 0,5–1% dawki THL, EAS5 wykazywał większość efektów wielocelowych indukowanych przez THL w komórkach NB4. Na podstawie tych wielokierunkowych efektów, THL może być rozważany jako uzupełniający i alternatywny środek terapeutyczny dla opornej APL.

Płyn Tian-Xian (TXL) indukuje apoptozę w komórkach rakowiaka jelita grubego HT-29 in vitro i hamuje wzrost guza in vivo

Streszczenie

Tło: Płyn Tian-Xian (TXL) to chińska mikstura lecznicza stosowana jako suplement diety przeciwnowotworowej. Niniejsze badanie ma na celu zbadanie wpływu TXL na apoptozę komórek HT-29 oraz wzrost guza in vivo.

Metody: Komórki raka jelita grubego HT-29 były traktowane gradientowymi rozcieńczeniami TXL. Potencjał błony mitochondrialnej mierzono za pomocą testu JC-1. Wydzielanie cytochromu c z mitochondriów oraz białka związane z apoptozą, takie jak Bax, Bcl-2, kaspaza-3 i -9 w formach aktywnych, badano metodą Western blot. Komórki HT-29 wszczepiono do myszy bezwłokowych (nude mice) w celu oceny wpływu TXL na wzrost guza.

Wyniki: TXL hamował wzrost guza w modelu HT-29 oraz wykazywał silny, zależny od dawki efekt hamujący proliferację komórek HT-29. Potencjał błony mitochondrialnej był obniżony przez TXL przy stężeniu powyżej 0,5%. W analizie Western blot zaobserwowano wzrost ekspresji Bax i spadek ekspresji Bcl-2 w komórkach traktowanych TXL. Leczenie TXL zwiększało poziom białek aktywnej kaspazy-3 i kaspazy-9, a także up-regulowało wydzielanie cytochromu c do cytoplazmy.

Wnioski: TXL istotnie hamuje proliferację komórek w modelu HT-29 oraz w modelu xenograftu HT-29 poprzez szlak śmierci komórkowej związany z mitochondriami.

Artykuł badawczy: Hamowanie metastazy, angiogenezy i wzrostu guza przez chińską mieszankę ziołową Tien-Hsien Liquid

Abstrakt

Tło: Zaawansowany rak jest chorobą wieloczynnikową, która wymaga leczenia celującego w wiele szlaków komórkowych. Chińska mieszanka ziołowa, zawierająca różne fitochemikalia, może celować w wiele zaburzonych szlaków w komórkach rakowych, co może stanowić alternatywną lub uzupełniającą metodę leczenia nowotworów. Wcześniej zgłosiliśmy, że chińska mieszanka ziołowa Tien-Hsien Liquid (THL) może specyficznie indukować apoptozę w różnych komórkach rakowych i wykazuje działanie immunomodulujące. W niniejszym badaniu dalszej ocenie poddano działanie THL w zakresie antymetastatycznym, antyangiogennym i przeciwnowotworowym w serii badań in vitro i in vivo.

Metody: Migracja i inwazja komórek rakowych oraz komórek śródbłonka były określane za pomocą testów Boyden chamber transwell. Wpływ THL na metastazowanie płucne oceniano poprzez iniekcję komórek rakowych CT-26 dożylnie do myszy syngenicznych. In vitro i in vivo formowanie mikrokrążenia oceniano za pomocą testu formowania rurek i testu Matrigel plug, odpowiednio. Wpływ THL na wzrost guza w badaniu in vivo oceniano za pomocą modelu xenograftu ludzkiego raka piersi MDA-MB-231. Ekspresję metaloproteinazy (MMP)-2, MMP-9 oraz aktywatora plazminogenu urokinazy (uPA) mierzono za pomocą żelatynowej zymografii. Ekspresję HIF-1α oraz fosforylację ERK1/2 określano metodą Western blot.

Wyniki: THL hamował migrację i zdolność inwazyjną różnych komórek rakowych in vitro, zmniejszał sekrecję MMP-2, MMP-9 i uPA oraz aktywność ERK1/2 w komórkach rakowych i tłumił metastazowanie płucne komórek rakowych CT-26 u myszy syngenicznych. Ponadto, THL hamował migrację, inwazję i formowanie rurek przez komórki śródbłonka in vitro, zmniejszał sekrecję MMP-2 i uPA w komórkach śródbłonka i tłumił neoangiogenezę w Matrigel plug u myszy. Oprócz działania hamującego na komórki śródbłonka, THL hamował ekspresję HIF-1α i czynnika wzrostu śródbłonka naczyniowego-A w komórkach rakowych wywołanych hipoksją. Ostatecznie nasze wyniki pokazują, że THL hamował wzrost ludzkich xenograftów raka piersi MDA-MB-231 u myszy NOD-SCID. To tłumienie wzrostu guza było związane ze zmniejszoną formacją mikrokrążenia i zwiększoną apoptozą wywołaną przez THL.

Wnioski: Nasze dane pokazują, że THL wykazuje szerokie działanie przeciwnowotworowe i zasługuje na dalszą ocenę pod kątem jego zastosowania w terapii nowotworowej.

“Tien-Hsien” Liquid Moduluje Produkcję Cytokin Stymulowanych Antygenami przez Komórki T od Pacjentów z Erozjowym Liszajem Białawym

Erozjowy liszaj białawy (EOLP) jest chorobą zapalną błony śluzowej jamy ustnej, która jest mediowana przez komórki T. Tien-Hsien Liquid (THL) jest ekstraktem z chińskich ziół leczniczych, który może modulować odpowiedź proliferacyjną i produkcję cytokin przez komórki T u pacjentów z nawracającymi owrzodzeniami aftowymi. W niniejszym badaniu sprawdziliśmy, czy THL może modulować produkcję cytokin stymulowanych antygenami przez komórki T u pacjentów z EOLP (komórki T EOLP). Komórki T izolowane z 15 pacjentów z EOLP inkubowano z fitohemaglutyniną (PHA), toksyną tężcową inaktywowaną glutaraldehydem (TT), glukozylotransferazą D (GtfD) lub antygenami *Streptococcus mutans* w obecności lub braku THL. Poziomy interleukiny (IL)-2, interferonu (IFN)-γ, czynnika martwicy nowotworów (TNF)-α, IL-6 i IL-10 w supernatantach hodowli komórek T mierzono za pomocą zestawów ELISA. Stwierdziliśmy, że THL znacząco zwiększał produkcję TNF-α i IL-6 stymulowaną przez PHA i TT przez komórki T EOLP. Jednak THL również znacząco zmniejszał produkcję IL-10 stymulowaną przez GtfD oraz produkcję TNF-α i IL-10 stymulowaną przez *S. mutans* przez komórki T EOLP. Ponieważ THL zarówno zwiększał, jak i zmniejszał produkcję cytokin stymulowanych antygenami przez komórki T EOLP, stwierdziliśmy, że THL moduluje produkcję cytokin stymulowanych antygenami przez komórki T EOLP.

Tradycyjny Chiński Środek Ziołowy Tian Xian Aktywuje Receptor Pregnanu X i Indukuje Ekspresję Genu CYP3A w Hepatocytach

Receptor pregnanu X (PXR, NR1I2) jest członkiem nadrodziny receptorów jądrowych, który jest aktywowany przez wiele klinicznie stosowanych związków i produktów naturalnych. Aktywacja PXR w wątrobie reguluje ekspresję genów kodujących białka, które są ściśle zaangażowane w wątrobowe wchłanianie, metabolizm i eliminację toksycznych związków z naszego organizmu. Interakcje ziołowo-lekowe mediatowane przez PXR mogą mieć niepożądane efekty u pacjentów stosujących terapie skojarzone. Może to być szczególnie ważne u pacjentów onkologicznych, którzy samodzielnie przyjmują dostępne bez recepty preparaty ziołowe razem z konwencjonalnymi chemioterapeutykami. Tian xian to tradycyjny chiński środek ziołowy o działaniu przeciwnowotworowym, który aktywuje ludzki PXR w komórkowych testach reporterowych. Co więcej, tian xian zmienia siłę interakcji między białkiem PXR a białkami koaktywatorów transkrypcyjnych. Nowa linia myszek zhumanizowanych PXR została opisana i wykorzystana w celu pokazania, że tian xian zwiększa ekspresję Cyp3a11 w pierwotnych hodowlach hepatocytów gryzoni. Tian xian indukuje również ekspresję CYP3A4 w pierwotnych hodowlach ludzkich hepatocytów. Łącznie, dane te wskazują, że współprzyjmowanie tian xian jest prawdopodobnie przeciwwskazane u pacjentów poddawanych terapii przeciwnowotworowej konwencjonalnymi środkami chemoterapeutycznymi. Dane te są szczególnie ważne, ponieważ ten środek ziołowy jest obecnie sprzedawany jako terapia wspomagająca, która zmniejsza efekty uboczne konwencjonalnej chemioterapii i jest dostępny bez recepty. Przyszłe badania powinny określić, w jakim stopniu współprzyjmowanie tego chińskiego środka ziołowego zmienia właściwości farmakokinetyczne i farmakodynamiczne konwencjonalnej terapii przeciwnowotworowej.

Chińska Medycyna Ziołowa Tien-Hsien Liquid Hamuje Wzrost Komórek i Indukuje Apoptozę w Szerokim Zakresie Ludzkich Komórek Nowotworowych

Cel: Tien-Hsien liquid (THL) to komercyjnie dostępna chińska mieszanka ziołowa, która jest stosowana jako suplement diety przeciwnowotworowej od ponad 10 lat. Niedawno wykazaliśmy, że THL ma silne działanie immunomodulujące na monocyty krwi obwodowej (PBMC) i komórki T. Aby dalej zbadać aktywność przeciwnowotworową THL, postanowiliśmy sprawdzić, czy THL może indukować apoptozę w różnych liniach komórkowych nowotworów ludzkich, bazując na fakcie, że THL zawiera kilka składników o funkcjach zabijających nowotwory.

Projekt: Wpływ hamujący wzrost THL na komórki ludzkiego raka szyjki macicy C-33A, komórki ludzkiego raka płuc H1299 oraz PBMC oceniano poprzez liczenie żywych komórek za pomocą metody wykluczania barwnika Trypan Blue. Aktywność indukującą apoptozę THL w komórkach H1299 oceniano przy użyciu czterech testów: (1) barwienie DNA jądrowego Hoechst 33258; (2) test terminalnej deoksyynukleotydylotransferazy z oznaczaniem końców dUTP (TUNEL); (3) test fragmentacji DNA nukleosomowego; (4) analiza komórek sub-G1. Aktywności kaspaz-8, -9 i -3 w komórkach H1299 traktowanych lub nie THL również mierzono, aby wyjaśnić możliwy mechanizm działania apoptozy indukowanej przez THL. Na koniec, efekt apoptotyczny THL na piętnastu liniach komórkowych nowotworów ludzkich i normalnych komórkach ludzkich analizowano przy użyciu testu TUNEL.

Wyniki: THL mogło indukować apoptozę we wszystkich badanych liniach komórkowych nowotworów ludzkich, ale nie w normalnych komórkach ludzkich. Leczenie komórek H1299 THL skutkowało aktywacją kaspaz-8, -9 i -3, a inhibitory tych kaspaz mogły częściowo blokować apoptozę indukowaną przez THL.

Wnioski: THL jest stosowane przez wiele lat przez liczne osoby z nowotworami bez znanych działań niepożądanych. Nasze obecne badania, które wykazały, że THL ma szerokie działanie zabijające nowotwory, dostarczyły podstaw molekularnych dotyczących terapeutycznej aktywności THL. Co więcej, ponieważ THL miał działanie apoptotyczne tylko na komórki nowotworowe, a nie na komórki normalne, ta selektywność sugeruje, że THL może być potencjalnym środkiem terapeutycznym w leczeniu nowotworów.

„Tien-Hsien Liquid” Może Modułować Produkcję Cytokin Stymulowanych Antygenami przez Komórki T Izolowane od Pacjentów z Nawrotowymi Owrzodzeniami Aphthous

Streszczenie: Nawrotowe owrzodzenia aphthous (RAU) są powszechną chorobą błony śluzowej jamy ustnej z zaburzeniami odporności humoralnej i komórkowej. Tien-Hsien Liquid (THL) to ekstrakt z chińskich ziół leczniczych o działaniu immunomodulującym. W poprzednich badaniach stwierdzono, że THL może modulować stymulowaną antygenowo odpowiedź proliferacyjną monocytów i komórek T izolowanych od pacjentów z RAU. W niniejszym badaniu dodatkowo sprawdziliśmy, czy THL może modulować produkcję cytokin stymulowanych antygenami przez komórki T izolowane od pacjentów z RAU. W tym celu komórki T izolowane od 19 pacjentów z RAU inkubowano z fitohemaglutyniną (PHA), tetanusem inaktywowanym glutaraldehydem (TT), glukozylotransferazą D (GtfD) lub antygenami Streptococcus mutans w obecności lub braku THL. Poziomy interleukiny (IL)-2, interferonu-γ (IFN-γ), czynnika martwicy nowotworów-α (TNF-α), IL-6 i IL-10 w supernatantach hodowli komórek T były mierzone za pomocą zestawów ELISA. Stwierdziliśmy, że THL znacząco zwiększył produkcję TNF-α, IL-6 i IL-10 stymulowaną przez PHA lub TT w komórkach T izolowanych od pacjentów z RAU. Jednak THL również znacząco zmniejszał produkcję IL-2 stymulowaną przez TT, produkcję IL-2, TNF-α, IL-6 i IL-10 stymulowaną przez GtfD oraz produkcję IFN-γ, TNF-α i IL-10 stymulowaną przez S. mutans w komórkach T izolowanych od pacjentów z RAU. Wyniki te wskazują, że THL może modulować produkcję cytokin stymulowanych antygenami przez komórki T izolowane od pacjentów z RAU. Ponieważ RAU jest prawdopodobnie chorobą mediowaną przez Th1 z podwyższonymi poziomami IL-2, IFN-γ, TNF-α i IL-6 zarówno w surowicy pacjentów, jak i w zmianach błony śluzowej jamy ustnej, a te podwyższone poziomy cytokin mogą być zmniejszone przez THL, sugerujemy, że THL może być potencjalnym środkiem immunoceutycznym w leczeniu RAU.

Immunomodulujące działanie „Tien-Hsien Liquid” na obwodowe komórki jednojądrzaste krwi i limfocyty T u pacjentów z nawrotowymi owrzodzeniami aftowymi

Streszczenie: Nawrotowe owrzodzenia aftowe (RAU) to powszechna choroba błony śluzowej jamy ustnej, związana ze zmianami w odpowiedzi humoralnej i komórkowej. W naszej placówce stosuje się immunomodulujący środek, lewamisol, do leczenia RAU z satysfakcjonującym efektem terapeutycznym. Tien-Hsien liquid (THL) jest ekstraktem z chińskich ziół leczniczych o działaniu immunomodulującym. Aby sprawdzić, czy THL ma działanie immunomodulujące na odpowiedź proliferacyjną (PR) komórek jednojądrzastych krwi obwodowej (PBMC) i limfocytów T izolowanych od pacjentów z RAU oraz czy THL jest potencjalnym lekiem na RAU, PBMC lub limfocyty T izolowane od pacjentów z RAU inkubowano z lipopolisacharydami (LPS) z Escherichia coli, fitohemaglutyniną (PHA), enterotoksyną B gronkowcową (SEB), toksoidem tężcowym inaktywowanym glutaraldehydem (TT), glukozylotransferazą D (GtfD) lub antygenami Streptococcus mutans w obecności lub nieobecności THL. Stwierdziliśmy, że THL znacząco zwiększał PR PBMC stymulowanych LPS od pacjentów z aktywnym RAU, PR PBMC i limfocytów T stymulowanych GtfD od pacjentów z nieaktywnym RAU oraz PR PBMC stymulowanych S. mutans od pacjentów z nieaktywnym RAU. Jednak THL mógł również znacząco zmniejszać PR PBMC i limfocytów T stymulowanych SEB od pacjentów z aktywnym RAU oraz PR limfocytów T stymulowanych S. mutans od pacjentów z aktywnym RAU. Wyniki te sugerują, że THL może modulować PR PBMC i limfocytów T stymulowanych antygenami u pacjentów z RAU. Dlatego może być potencjalnym środkiem immunoceutycznym do leczenia RAU.